Cube社 製品概要
試薬および製造原料の輸入販売 シングルセル解析

PureCube Hisタグ用Ni/Co配位磁気ビーズ


磁気ビーズは培養上清からの精製やプルダウン実験に最適です。

PureCube磁気ビーズはニッケルイオンを配位したキレートリガンド(IDAまたはNTA)を結合したアガロースビーズでコーティングされたフェリ磁性体です。どちらのリガンド-金属システムもHisタグタンパク質を効果的に結合します。

  • 25%サスペンジョンでお届け
  • 70 mg/mLまでの結合能 (Ni-NTA)
  • IDAおよびNTA磁気ビーズの両方がご提供可能 (IDAとNTAの違いについてはこちら)
  • 抗Hisタグ抗体の別途ご提供も可能

実験室レベルから生産スケールまで一貫性を持って磁気ビーズの分離を行うために、Sepmag均一系バイオ磁気分離システムをお勧めします。

(注)より高レベルでの発現や大スケールでの精製用にはPureCube Hisアフィニティアガロースのご使用をお勧めします。

Hisタグタンパク質のウェスタンブロットでの検出用にCube社ではタグ特異的抗体のご提供も行っております。


高い結合容量

PureCube Ni-IDA磁気ビーズは1mLあたり40mgのタンパク質の結合が可能であり、他の競合製品と同等の結合能力を保持します。Figure 1 は大腸菌で発現した6-His Interleukin-betaをPureCube Ni-IDA 磁気ビーズおよび競合製品で精製したサンプルのSDS-PAGEの結果が示されております。同等の量のタンパク質が3つの溶出液から回収されていることがわかります。

PureCube Ni-NTA磁気ビーズは非常に高い結合容量を示します。2社のマーケットリーダーから販売されている同等品とPureCube Ni-NTA磁気ビーズで大腸菌発現GFPを精製する実験が別途実施されました。Figure 2 はSDS-PAGEの結果を比較したものです。競合Gを用いて4つの溶出フラクションから回収された総タンパク質量は競合Qより多く、PureCube Ni-NTA磁気ビーズを用いて4つの溶出フラクションから回収された総タンパク質(Cube, E1-E4)は競合G製品と比較してさらに46%も多いことが確認されました。

Fig.1
PureCube Ni-IDA磁気ビーズの結合容量はマーケットリーダーのNi磁気ビーズと同等です。PureCube Ni-IDA磁気ビーズおよび競合Gの磁気ビーズ製品を用いて精製されたinterleukin-betaのSDS-PAGEの結果は溶出フラクション(E1-E3)のタンパク質濃度が同等であることを示しています。


Fig.2
大腸菌発現GFPをPureCube Ni-NTA 磁気ビーズおよび市場で広く仕様されている競合2製品で精製した結果のSDS-PAGE。PureCube Ni-NTA 磁気ビーズでは46%以上高収率でタンパク質が回収できます。4つの溶出フラクションから回収されたタンパク質の総量を比較すると、競合G製品を用いて精製された結果(E1-E4, G)は競合Q製品を用いて精製された結果(E1-E4, Q)より回収率が高く、PureCube Ni-NTA磁気ビーズは競合G製品よりもさらに46%高い(E1-E4, Cube)結果が得られました。M: マーカー; FT: フロースルー; W1, W4: 洗浄フラクション; E1-E2: 溶出フラクション。


IDAとNTAの比較

Figure 3 に示される様に、iminodiacetic acid (IDA)およびnitrilotriacetic acid (NTA)キレートリガンドはニッケルとHisタグのイミダゾール環の間と類似した相互作用をサポートします。これらのリガンド間ではまず、サイズが異なります。IDAは小さく、高密度にレジンに結合し、高い結合能を誇ります。一方、IDAの配位数はNTAより少数です (オレンジ)。結果として、IDAレジンからは金属イオンが溶離しやすく、NTAと比較して溶離タンパク質の純度は低くなります。

Fig.3
NTAとIDAの比較。キレートリガンドであるnitrilotriacetic acid (NTA)およびiminodiacetic acid (IDA)は両方ともNi2+ とポリヒスチジンのイミダゾール環の間の相互作用を類似の方式でサポートしますが、サポートの際のNi2+との配位数はNTAでは 4価ですが、IDAでは3価です(オレンジ)。この差異が得られるタンパク質の質に影響を与えます。


Ni/Co配位磁気ビーズのリスト

カタログ番号 製品名と内容
ニッケル配位IDA磁気ビーズ
30201 PureCube Ni-IDA MagBeads (1 mL)
25% suspension
30205 PureCube Ni-IDA MagBeads (5 mL)
25% suspension
30225 PureCube Ni-IDA MagBeads (25 mL)
25% suspension
30290 PureCube Ni-IDA MagBeads (4×25 mL)
25% suspension
コバルト配位IDA磁気ビーズ
30501 PureCube Co-IDA MagBeads (1 mL)
25% suspension
30505 PureCube Co-IDA MagBeads (5 mL)
25% suspension
30525 PureCube Co-IDA MagBeads (25 mL)
25% suspension
30590 PureCube Co-IDA MagBeads (4×25 mL)
25% suspension
無配位IDA磁気ビーズ
30801 PureCube IDA MagBeads (1 mL)
25% suspension
30805 PureCube IDA MagBeads (5 mL)
25% suspension
30825 PureCube IDA MagBeads (25 mL)
25% suspension
30890 PureCube IDA MagBeads (4×25 mL)
25% suspension
ニッケル配位NTA磁気ビーズ
31201 PureCube Ni-NTA MagBeads (1 mL)
25% suspension
31205 PureCube Ni-NTA MagBeads (5 mL)
25% suspension
31225 PureCube Ni-NTA MagBeads (25 mL)
25% suspension
31290 PureCube Ni-NTA MagBeads (4×25 mL)
25% suspension
コバルト配位NTA磁気ビーズ
31501 PureCube Co-NTA MagBeads (1 mL)
25% suspension
31505 PureCube Co-NTA MagBeads (5 mL)
25% suspension
31525 PureCube Co-NTA MagBeads (25 mL)
25% suspension
31590 PureCube Co-NTA MagBeads (4×25 mL)
25% suspension
無配位NTA磁気ビーズ
31801 PureCube NTA MagBeads (1 mL)
25% suspension
31805 PureCube NTA MagBeads (5 mL)
25% suspension
31825 PureCube NTA MagBeads (25 mL)
25% suspension
31890 PureCube NTA MagBeads (4×25 mL)
25% suspension
抗Hisタグ抗体
40040 PentaHis antibody** (0.1 mg)
BSA-free, lyophilized
磁気ビーズ & 抗体セット
40046 Pulldown & Detect Set His tag:
Contains PureCube Ni-NTA MagBeads (5 mL) &
PentaHis Antibody* (0.1 mg) BSA-free, lyophilized

**Manufactured by QIAGEN.

このページのトップへ
お気軽にお問い合わせ・ご相談ください 受託開発サービスはこちら TEL:03-6277-3233 FAX:03-6277-3265 メールでのお問い合わせ:customer@bizcomjapan.co.jp

バイオ関連の受託開発サービス・試薬の輸入販売ならビジコムジャパンにお問い合わせください。お客様の用途やご要望に沿ったサービス、各種試薬・製造原料の販売をいたします。

ビジコムジャパンへのお問い合わせはこちら