試薬および製造原料の輸入販売 シングルセル解析


HEKMax® ヒト細胞発現系によるタンパク質・抗体の作製

アクロバイオシステムズは目的タンパク質を迅速かつ確実に作製します。独自に開発した革新的なHEKMax® 培養
システムにより、高品質のタンパク質を効率よく生産します。HEKMax® では培地に血清、タンパク質、加水分解
物を使わない条件でHEK293細胞を培養してタンパク質を生産します。

  • 飛躍的に高い発現効率(通常の2~5倍)
  • 短い納期(4~6週間)
  • 経済的
  • ロット間差が小さい
  • 優れたスループットとフレキシビリティー

HEKMax® のキーとなるテクノロジー

  • 独自のコドン最適化法により発現効率が向上
  • HEK293細胞による一過性発現に適した特許取得の発現ベクターを使用
  • バックグランドが低く代謝プロファイルが最適なHEK293細胞株を使用
  • 血清および動物由来の原料を使わず、化学的に既知な培地を使った高密度培養
  • タグフリーのタンパク質を分離する新技術
  • 同時生産にもフレキシブルに対応100mgスケールで40種類以上、数gスケールで5種類

*

図:HEKMax® による一過性発現では、細胞密度と 抗体価が非常に高い水準に達する(488mg/L)

タンパク質 ヒトバイオマーカー
タンパク質A
ヒトサイトカイン
タンパク質B
ヒト
タンパク質C
マウス
タンパク質D
マウス
タンパク質E
HIV-1 ウィルス
タンパク質F
HEKMax®
発現系
12.1mg/L 33.7mg/L 48.0mg/L 103.5mg/L 6.2mg/L 35.2mg/L
文献 2-4mg/L 4-6mg/L 5-7mg/L N/A 1-2mg/L 5-10mg/L
HEKMax

HEKMax® 安定発現細胞株

アクロバイオシステムズは前臨床および臨床研究に必要なタンパク質のバルク生産を受託します。独自の革新的なHEKMax® 安定発現細胞株作製技術により、目的タンパク質を発現するHEK293細胞株を3~4ヶ月で作製します。続いて、スケールアップした発現系で必要量のタンパク質を生産します。生産は完全に動物由来成分を含まない条件で行います。

プラスミドの構築

0.5ヶ月

HEK293P細胞トランスフェクション

1ヶ月

トランスフェクト細胞

1ヶ月

スクリーニング、クローンの選別

1ヶ月

スケールアップ、生産

1-1.5ヶ月

精製タンパク質、QC、調合、充填

分子生物学研究支援

アクロバイオシステムズは、遺伝子合成、変異体作製、サブクローニング、プラスミド調製(mgレベル)など、分子生物学研究に関する一連のサービスを提供します。高品質の製品をお届けすることで研究全体をサポートします。また、タンパク質発現サービスも提供しており、タンパク質調製のすべてのニーズにお応えします。

受託サービス

遺伝子合成
遺伝子変異導入

サブクローニング

プラスミドDNAの調製

E. Coli によるタンパク質発現

E. Coli はリコンビナントタンパク質発現のホストとして長年使われています。他のホストに比べて速さ、コスト、生産性の面で優れています。E. Coli によるタンパク質発現は、研究や生産現場で初めに検討される方法です。
アクロバイオシステムズは、糖鎖修飾を必要としないタンパク質を独自の発現ベクターとE. Coli培養条件を用いて生産します。自社で開発したコドン最適化技術、タンパク質発現系、精製プラットフォームによりmgオーダーのタンパク質を安価に提供します。

受託内容

受託項目 作業内容 納品物 期間
遺伝子合成および
プラスミド構築
  • コドンの自社技術による最適化
  • 遺伝子合成および検証
  • 独自に開発した発現ベクターをクローン化
  • 遺伝子シークエンスデータ
  • プラスミド
20日
培養
  • 段階的にスケールアップ
  • 1-50LのスケールでE. Coliを培養
  2-4日
精製およびQC
  • E. Coliを回収して超音波破砕/清澄化
  • クロマトグラフィーによる精製
  • 分析
  • 精製タンパク質(mg~g)
  • QC報告書
3-5日

哺乳動物細胞によるタンパク質発現

哺乳動物細胞をホストに使ってリコンビナントタンパク質、抗体、ウイルスタンパク質を発現させることには、他のホストを使う場合に比べて大きな利点があります。哺乳動物細胞が持つ翻訳後修飾機構により、N-結合およびO-結合グリコシル化を受け、適切にフォールディングされたタンパク質が発現します。研究目的に見合った機能性を持つタンパク質を得ることができます。CHOや293を用いる一過性発現により、安定発現細胞株を使う場合に比べて、短時間に質の高いタンパク質を低コスで生産することができます。

アクロバイオシステムズのラピッド・プロテイン・プロダクション(RPP)サービスは、CHOおよび293細胞を用いた一過性発現によるタンパク質受託生産サービスです。自社の特許技術により、タンパク質をグラムオーダーで調製します。

受託内容

受託項目 作業内容 納品物 期間
遺伝子合成および
プラスミド構築
  • 自社技術によるコドン最適化
  • 遺伝子合成および検証
  • 独自の哺乳細胞用発現ベクターをクローン化
  • 遺伝子シークエンスデータ
  • プラスミド
20日
プラスミド調製
  • E. Coli 培養
  • 独自の方法によりプラスミドを大量調製
  • プラスミド(> 1mg)
    (低エンドトキシン)
2日
パイロットスケールでの
発現および精製の評価
  • 自社開発の全成分既知の培地/栄養成分のスクリーニング
  • ハイスループット精製法のスクリーニング(実験計画法DoEによる、タグフリーまたはタグ除去を考慮)
  • 発現レベル報告書
  • 作業報告書
4-6日
スケールアップ生産
  • 播種を繰り返し増殖、バイオリアクター使用、細胞回収し清澄化
  • カラム精製、
  • 分析分析
  • 精製タンパク質
    (mg~g、分析表添付)
  • 作業報告書
8-10日

安定発現細胞株作製

安定発現細胞株の作製には時間と労力がかかります。リコンビナントタンパク質やモノクローナル抗体を哺乳動物細胞により発現させるために、CHOやNS0細胞の安定発現細胞株を得ようとしても、時としてうまくいかないこともあります。


アクロバイオシステムズは生産用および研究用のCHO細胞株(DG44, DUKX-B11, CHO-S, CHO-K1)を提供します。独自の発現ベクター、ハイスループット細胞スクリーニング技術、血清および動物由来成分を使わない培養プロセスを使い、短期間に安定発現細胞株を作製します。

受託項目 作業内容 納品物 期間
遺伝子合成および
プラスミド構築
  • 自社技術によるコドン最適化
  • 遺伝子合成および検証
  • 哺乳動物細胞用に独自に開発した発現ベクターをクローン化
  • 遺伝子塩基配列データ
  • プラスミド
25日
一過性発現の評価
  • フラスコケールでの一過性発現
  • ELISAによる発現レベルの測定
  • 実行可能性に関する報告書
10日
トランスフェクション
クローンスクリーニング
  • 3手法で行い、それぞれ3回クローンをスクリーニング
  • 上位5つのクローンについてフラスコスケールで評価
  • 長期培養後(50PDL)安定性評価(要望に応じて)
  • 上位3種のクローン
  • 発現安定性データ
  • 無菌試験/マイコプラズマ否定試験
  • 他のQC(要望に応じて)
40-60日
生産プロセス開発
(オプション)
  • 自社開発の成分基地の培地/栄養成分を用いて培養条件を最適化
  • ハイスループット精製法のスクリーニング、実験計画法(DoE)による
  • 分析法の開発
  • 精製タンパク質
    (mg~gオーダー)
  • 作業報告書
要相談
タンパク質生産
(オプション)
  • 10L-50L バイオリアクターを使用
  • 成分既知の培養液/栄養成分を使用
  • 工程管理
  • 精製タンパク質
  • 作業報告書
  • その報告書(必要に応じて)
要相談

プロセス開発

アクロバイオシステムズはプロセス開発をサポートします。効率の良いハイスループットプラットフォームをベースに、お客様のニーズに合わせて開発します。

受託内容

  • 細胞培養プロセス開発のための培地/栄養成分の最適化
  • 発酵/細胞培養プロセス開発
  • 精製プロセス開発

分析サービス

アクロバイオシステムズはタンパク質の定性定量分析サービスを提供します。

受託内容

  • 細胞培養プロセスにおける成分消費量測定(アミノ酸、グルコース、ビタミン、乳酸、アンモニア)
  • SDS-PAGE(還元、非還元)
  • HPLCによる純度測定(逆相、ゲルろ過、イオン交換など)
  • ペプチドマッピング
  • ウエスタンブロッティング
  • ELISA
  • 定量PCR
  • 細胞活性測定(MTT)
  • 結合定数測定(ELISA)
  • N-末端アミノ酸配列分析
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